Ο Νικόλαος Α. Ε. Καλοσπύρος γεννήθηκε στην Αθήνα. Σπούδασε στη Φιλοσοφική Σχολή του Πανεπιστηµίου Αθηνών (Τµήµα Κλασικής Φιλολογίας) µε υποτροφία του Ι.Κ.Υ. και για τα τέσσερα έτη σπουδών του. Είναι κάτοχος Μεταπτυχιακού και Διδακτορικού Διπλώµατος Ειδίκευσης στην Κλασική Φιλολογία.
Διδάσκει µαθήµατα της ειδικότητάς του στο Τµήµα Μεθοδολογίας, Ιστορίας και Θεωρίας της Επιστήµης και αντίστοιχα μαθήματα στο ΠΜΣ «Ανάγνωση, Φιλαναγνωσία και Εκπαιδευτικό Υλικό» στο ΠΤΔΕ του ΕΚΠΑ.
Είναι µέλος της European Society for Textual Scholarship, της αντίστοιχης Ευρωπαϊκής Εταιρείας για τη µελέτη της αρχαίας Ιατρικής, της Εταιρείας Παπαδιαµαντικών Σπουδών και επιστηµονικός συνεργάτης του Ιδρύµατος «Θησαυρός της Ελληνικής Γλώσσης» σε θέµατα ψηφιοποίησης ελληνικών κειµένων, βιβλιογραφικής ενηµέρωσης και λογισµικού αναζήτησής τους.
Στα επιστηµονικά του ενδιαφέροντα και δηµοσιεύµατα περιλαµβάνονται η ιστορία της κλασικής φιλολογικής επιστήµης στη νεώτερη Ελλάδα και Ευρώπη, η θεωρία και φιλοσοφία της κριτικής και εκδοτικής του κειµένου, η θεωρία και η διδακτική της λογοτεχνίας, ο Αδαµάντιος Κοραής ως κριτικός φιλόλογος, η αρχαία ιατρική (Ιπποκράτης), η αρχαία λογοτεχνική θεωρία, η ρητορική τέχνη, η ιστορία της ελληνικής γλώσσας, οι ψηφιακές σπουδές στις ανθρωπιστικές επιστήµες (Digital Humanities), η υφολογία και αρχαιογνωσία του Αλέξανδρου